Để có thể cài được gen cần chuyển vào plasmit hoặc phage, người ta sử dụng enzym cắt giới hạn, một loại enzym có khả năng nhận ra một trình tự ADN đặc thù được gọi là vị trí giới hạn và cắt cả hai loại ADN của thể truyền và gen cần chuyển ở một điểm chính xác tại vị trí giới hạn để tạo ra các đầu dính so le gồm các nuclêôtit không kết cặp (ở dạng sợi đơn). Điều này rất quan trọng vì
chỉ một sợi của ADN mang thông tin mã hóa cho prôtêin. các đoạn nuclêôtit đó chính là điểm khởi đầu cho quá trình tái bản ADN. nó cho phép tế bào nhận ra các đoạn ADN được cắt bởi cùng một loại enzym đó. đầu dính đó có thể liên kết bổ sung với đầu dính khác được tạo ra bởi cùng một loại enzym.